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常見微生物的滅菌方法

更新時間:2016-06-28   點(diǎn)擊次數(shù):7275次

 

常用滅菌法

1)干熱滅菌法 常見的有火焰、燒灼、干烤和紅外線滅菌等。

①火焰、燒灼:通常用于實(shí)驗室無菌操作中金屬或其它耐火材料制成的器具的滅菌。

②干烤和紅外線:利用干熱空氣或熱輻射進(jìn)行滅菌。一般135~145℃需3~5h,160~170℃需2h以

上,170~180℃需1h以上,180~200℃需0.5~1h。除熱原則需250℃30min,或

200℃45min180℃2h。空氣傳熱慢,穿透力不強(qiáng),故干熱滅菌時間長。干熱滅菌時烤箱內(nèi)裝入物

品應(yīng)留有隙,以利空氣流動,否則使箱內(nèi)溫度不均,部分物品滅菌不*。

2)濕熱滅菌法 通過熱蒸汽或沸水使蛋白質(zhì)變性而殺滅微生物的方法。濕熱穿透

力強(qiáng),滅菌效果較干熱好。

①煮沸或流通蒸汽滅菌:常壓下沸水和蒸汽的溫度是100℃,一般處理30~60min可殺死細(xì)菌繁體,但不能*殺滅芽孢。此法適用于不能高壓蒸汽滅菌的物品。

②低溫間隙滅菌(巴斯德滅菌法):將物品先用60~80℃加熱(或煮沸)1h,然后置20~25℃保

存24h(或常溫過),使其中殘存的芽孢萌發(fā)成繁殖體,再用以上條件滅菌,如此反復(fù)三次。

本法適用于不耐高溫或高溫下易變質(zhì)的物品,但很費(fèi)時。

③高壓蒸汽滅菌(熱壓滅菌法):超過一個大氣壓時,水的沸點(diǎn)高于100℃,反之亦然.高壓蒸

汽滅菌就是通過加壓提高蒸汽溫度,滅菌效果。它簡便、經(jīng)濟(jì)、可靠、無毒,是zui可靠、

應(yīng)用zui廣泛的滅菌法。此法適用于耐高溫和潮濕的物品。

常用條件為:

115.5℃         30min

121.5℃         20min

126.5℃         15min

注意事項:

a. 必須*排出滅菌器內(nèi)的空氣。否則會影響滅菌器內(nèi)溫度達(dá)到規(guī)定的要求。

b. 注意被滅菌物品的溫度。滅菌器內(nèi)溫度與被滅菌物品的溫度一般是一致的,但在蒸汽輸入過

快時,后者可能低于前者,所以升溫時要有一定的預(yù)熱時間。另外,降溫過快易引起玻璃炸

裂。因此,對于一種滅菌產(chǎn)品應(yīng)制定一固定的滅菌曲線(象凍干曲線一樣)。

c. 定期檢查滅菌器內(nèi)溫度的準(zhǔn)確性。

3)化學(xué)滅菌法 利用化學(xué)試劑形成的氣體來殺滅微生物的方法。

常用的滅菌劑為環(huán)氧乙烷(又稱氧化乙烯)。環(huán)氧乙烷是廣譜殺菌劑,能殺滅細(xì)菌、芽孢和多

種病毒,還能殺死昆蟲及蟲卵。但由于環(huán)氧乙烷易燃易爆且有毒(有致變異性),用于藥品方

面極有限,多用于醫(yī)療器械、塑料制品等滅菌。(不能用于橡膠和乳膠手套,能將其溶解。)

4)濾過除菌法 利用細(xì)菌不能通過致密具孔濾材的原理,除去對熱不穩(wěn)定的藥品溶液或液體

物質(zhì)中的細(xì)菌的方法。過濾法一般只能除菌,不能除去支原體和病毒。過濾除菌的效果與濾膜

的性能、孔徑的大小、密度、濾膜的厚度等因素有關(guān)。

濾過除菌法要求zui終過濾的濾膜孔徑為0.22μm。由于各廠家生產(chǎn)的相同規(guī)格的濾膜質(zhì)量并不一

致,為了保證除菌效果,在使用前后應(yīng)檢查濾器的完好性(如壓力維持試驗或起泡點(diǎn)試驗)。

一個過濾器的使用時間應(yīng)根據(jù)品種驗證后確定,一般不應(yīng)超過8小時。

5)輻射滅菌法 輻射有兩種類型:一種是電磁波輻射,如紫外線、紅外線、微波;一種是電

離輻射,如可引起被照射物電離的X射線、γ射線。

①紫外線:紫外光波長在136~390nm之間,其中260nm左右能破壞核酸,殺菌作用zui強(qiáng)。另外,

空氣中的氧受紫外線照射后,可微量轉(zhuǎn)變?yōu)槌粞豕餐饸⒕饔谩W贤饩€消毒的效果與光源的

功率、光源與被照射物的距離、照射時間、溫度和濕度等因素有關(guān)。我國規(guī)定紫外燈照射強(qiáng)度

在距離1m處不低于70μW/cm2(以紫外線測強(qiáng)儀測定)。在操作面上要求強(qiáng)度達(dá)40μW/cm2以

上。一般每10m2裝30W燈管1支,工作前開30~60min。

紫外燈的輸出功率隨使用時間增加而降低。國產(chǎn)紫外燈的平均壽命(點(diǎn)到70%額定功率的時間)

一般為2000h,超過平均壽命時,就達(dá)不到預(yù)期效果,必須更換。

紫外線的穿透力很弱,不能穿透一般包裝材料,如玻璃、塑料薄膜、紙等。玻璃能強(qiáng)烈吸收小

于350nm的紫外線,石英玻璃能吸收小于200nm的紫外線。因此,它主要用于空氣和物體表面消

毒,特制的紫外燈裝置也可用于水的消毒。紫外線對眼、皮膚有損壞,照射過程中產(chǎn)生的臭氧

對眼、鼻腔有刺激,臭氧過多時使人頭暈、胸悶、血壓下降。

②紅外線:通過加熱碳化硅板產(chǎn)生的輻射熱能,由空氣傳導(dǎo)加熱滅菌。如紅外線烤箱,溫度可

達(dá)180℃左右。熱效應(yīng)特點(diǎn)是由表及里。

③微波:微波滅菌主要是因其熱效應(yīng)。微波加熱升溫快,溫度高且均勻,殺菌作用強(qiáng)。熱效應(yīng)

特點(diǎn)是由里及表。不同性質(zhì)的物品吸收微波的能力不同,其熱效應(yīng)和消毒效果也不同。微波有

一定穿透力,但不強(qiáng)。微波對人體有害,要注意防護(hù)。

④60Co滅菌:放射性同位素60Co(或137Cs)衰變時可放射出γ射線,γ射線的能量高、穿透力

強(qiáng),可使細(xì)胞內(nèi)各種活性物質(zhì)發(fā)生化學(xué)變化,從而使細(xì)菌損傷或死亡。

經(jīng)60Co輻射滅菌的物品溫度升高很少,一般僅約5℃,故又稱“冷滅菌”。60Co輻射存在兩個方

面的安全問題:一是輻射的直接作用。γ射線對人體細(xì)胞同樣有害;二是經(jīng)過輻射的食品、藥

品的安全性。1984年美國農(nóng)業(yè)部食品安全實(shí)驗室用輻射處理的雞肉喂飼小鼠,發(fā)現(xiàn)患**腫瘤增

加,包括加重癌病損害。因此60Co輻射用于食品和藥品都應(yīng)經(jīng)過安全試驗,進(jìn)行科學(xué)的、全面

的評價

 

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